Questão de Biologia — Ecologia e ciências ambientais — CESPE / CEBRASPE 2024

Ensaio do cometa: biomarcador de dano ao DNA e sua relação com citotoxicidade

❌ ERRADO. O teste do cometa (eletroforese em gel de células únicas) é um biomarcador de dano ao DNA, e a afirmativa de que ele "não é recomendado para estudos de citotoxicidade" está incorreta. Na verdade, o ensaio do cometa é amplamente utilizado em estudos de genotoxicidade e também pode ser empregado como indicador de citotoxicidade, pois danos ao DNA frequentemente precedem ou acompanham a morte celular. A justificativa apresentada — de que mecanismos citotóxicos podem envolver alterações funcionais sem dano direto ao DNA — não invalida o uso do teste, apenas indica que ele não detecta todos os tipos de citotoxicidade.

O ensaio do cometa, também chamado de eletroforese em gel de células únicas (SCGE), é uma técnica sensível para detectar quebras de fita simples e dupla no DNA, bem como sítios álcali-lábeis. A imagem típica mostra células com "caudas" de DNA migrando em direção ao ânodo; o comprimento e a intensidade da cauda são proporcionais ao grau de dano. Essa técnica é amplamente usada em toxicologia genética, biomonitoramento ambiental e estudos de carcinogênese.

A relação entre genotoxicidade e citotoxicidade é complexa: um agente pode ser citotóxico sem ser genotóxico (por exemplo, inibindo enzimas vitais ou danificando membranas), e pode ser genotóxico sem ser imediatamente citotóxico (por exemplo, causando mutações que não levam à morte celular imediata). No entanto, o ensaio do cometa pode ser adaptado para avaliar citotoxicidade indiretamente, por meio de parâmetros como a porcentagem de células com dano extenso ("células cometa") ou a fragmentação do DNA associada à apoptose/necrose. Portanto, a afirmativa de que o teste "não é recomendado" é uma generalização incorreta.

A pegadinha da banca está em sugerir que, por não detectar todos os mecanismos citotóxicos, o teste seria inútil para esse fim. Na prática, o ensaio do cometa é uma ferramenta complementar: ele detecta dano genético, que é um dos possíveis mecanismos de citotoxicidade, e sua aplicação em estudos de citotoxicidade é válida, desde que interpretada com cautela.

Item — ❌ ERRADO

A afirmativa diz que o teste do cometa "não é recomendado para estudos de citotoxicidade". Isso é falso. O ensaio do cometa é recomendado e utilizado em estudos de genotoxicidade e, por extensão, pode contribuir para avaliações de citotoxicidade, especialmente quando o dano ao DNA é um dos mecanismos envolvidos. A justificativa apresentada ("mecanismos citotóxicos podem envolver alterações em funções celulares sem causar danos diretos ao material genético") é verdadeira em si, mas não torna o teste inadequado; apenas delimita seu escopo. O teste não é a única ferramenta para avaliar citotoxicidade, mas é uma delas, e a afirmativa o descarta de forma absoluta, o que está errado.

Gabarito: ❌ ERRADO