Questão de Biologia — Identidade dos seres vivos — CESPE / CEBRASPE 2025

CRISPR-Cas9: mecanismo de edição gênica

✅ CERTO. A afirmativa descreve corretamente o funcionamento do sistema CRISPR-Cas9: a endonuclease Cas9, guiada por um RNA guia (sgRNA), realiza um corte na dupla fita do DNA, e a reparação celular desse corte pode gerar mutações que inativam ou alteram genes. Essa é a base da técnica de edição gênica, conforme descrito na literatura especializada.

O sistema CRISPR-Cas9 é uma ferramenta de edição genética derivada de um mecanismo de defesa bacteriana contra vírus. Em laboratório, utiliza-se um RNA guia único (sgRNA), que combina a sequência guia (gRNA) com o RNA transativador (tracrRNA), para direcionar a enzima Cas9 a um local específico do genoma. A Cas9, uma endonuclease, possui dois domínios catalíticos que cortam as duas fitas do DNA, gerando uma quebra dupla (DSB – double-strand break).

A partir daí, a célula repara a quebra por dois mecanismos principais:

• Junção de extremidades não homólogas (NHEJ): reparo impreciso que frequentemente insere ou deleta nucleotídeos (indels), podendo causar mutações de deslocamento de quadro de leitura e inativar o gene alvo.

• Recombinação homóloga (HR): reparo preciso que utiliza uma sequência doadora como molde, permitindo introduzir mutações específicas ou inserir novos genes.

Portanto, a afirmativa está correta ao afirmar que o corte pela Cas9, seguido de reparo, pode gerar mutações que inativam ou alteram genes. Essa é a essência da técnica de edição gênica, amplamente utilizada em pesquisa e biotecnologia.

✅ CERTO.