Questão de Farmácia — Biologia Molecular e Biotecnologia — CESPE / CEBRASPE 2026

Clonagem de DNA e produção de fármacos recombinantes

Gabarito: letra A. As enzimas de restrição (ou endonucleases de restrição) são as "tesouras moleculares" da engenharia genética: reconhecem sequências específicas de nucleotídeos no DNA e cortam a molécula exatamente nesses sítios, permitindo isolar o gene de interesse para posterior clonagem. As demais alternativas trocam as funções das enzimas e dos vetores envolvidos no processo.

A produção de medicamentos por DNA recombinante é um dos pilares da biotecnologia moderna. O processo começa com a identificação e o isolamento do gene que codifica a proteína terapêutica desejada — por exemplo, o gene da insulina humana. Para isso, utilizam-se as enzimas de restrição, que funcionam como tesouras moleculares: cada uma reconhece uma sequência específica de bases no DNA e corta a dupla fita nesse ponto exato. Esse corte gera fragmentos com extremidades adesivas ou cegas, que podem ser combinados com outras moléculas de DNA.

Em seguida, o gene isolado é inserido em um vetor de clonagem — geralmente um plasmídeo bacteriano ou um vírus. A enzima responsável por unir o gene ao vetor é a DNA ligase, que catalisa a formação de ligações fosfodiéster entre as extremidades do DNA, criando a molécula de DNA recombinante. O vetor recombinante é então introduzido em uma célula hospedeira (como a bactéria Escherichia coli), que se multiplica e produz muitas cópias do gene — os clones — e, consequentemente, a proteína de interesse em grande escala.

A confusão mais comum nesse tema é atribuir à DNA polimerase a função de ligação dos fragmentos. A DNA polimerase é a enzima que sintetiza novas fitas de DNA a partir de um molde, sendo essencial na replicação e na técnica de PCR (Reação em Cadeia da Polimerase), mas não é ela que une o inserto ao vetor. Quem faz essa "colagem" é a DNA ligase. Já as enzimas de restrição não modificam células-tronco nem realizam edição gênica em hospedeiros; sua função é exclusivamente cortar o DNA em sítios específicos.

Guarde o papel de cada molécula: enzima de restrição = corta, DNA ligase = une, DNA polimerase = sintetiza. É exatamente essa distinção que separa a alternativa correta das demais.

Alternativa A — ✅ Correta ⟵ GABARITO

As enzimas de restrição (endonucleases de restrição) reconhecem sequências palindrômicas específicas no DNA e cortam a molécula nesses sítios, produzindo fragmentos com extremidades adesivas ou cegas. Essa especificidade é o que permite isolar genes de interesse com precisão, como descrito no processo de clonagem. O texto de apoio confirma: "as enzimas de restrição cortam o DNA em sequências específicas".

Alternativa B — ❌ Incorreta

A enzima que faz a ligação entre o DNA do plasmídeo (vetor) e o DNA do organismo a ser modificado (inserto) é a DNA ligase, não a DNA polimerase. A DNA polimerase sintetiza novas fitas de DNA a partir de um molde, sendo usada na replicação e na PCR, mas não tem função de unir fragmentos de DNA entre si. A alternativa troca o papel da DNA ligase pela DNA polimerase.

Alternativa C — ❌ Incorreta

As enzimas de restrição não modificam células-tronco do hospedeiro. Elas atuam in vitro, cortando moléculas de DNA em sítios específicos para permitir a manipulação genética. A modificação de células-tronco, quando ocorre, é feita por outras técnicas (como vetores virais ou CRISPR), não por enzimas de restrição diretamente.

Alternativa D — ❌ Incorreta

Os medicamentos produzidos por DNA recombinante não são introduzidos no hospedeiro para que este edite seu próprio DNA. Na verdade, o gene de interesse é inserido em um vetor (plasmídeo ou vírus), que é introduzido em uma célula hospedeira (bactéria, levedura etc.) para que esta produza a proteína terapêutica. A edição do DNA do hospedeiro não é o objetivo; o objetivo é a produção da proteína recombinante.

Alternativa E — ❌ Incorreta

Os medicamentos não são sintetizados por vírus modificados. Os vírus podem ser usados como vetores para introduzir o gene de interesse em células hospedeiras, mas quem sintetiza a proteína é a maquinaria celular do hospedeiro (bactérias, leveduras ou células de mamíferos), não o vírus em si. A alternativa confunde o papel do vetor com o do produtor.

Gabarito: letra A