Questão de Biologia — Moléculas, células e tecidos — CESPE / CEBRASPE 2026
Biologia›Moléculas, células e tecidos
Código
ce232016
Banca
CESPE / CEBRASPE
Órgão
VALEC
Ano
2026
Nível
Superior
Cargo
Analista - Especialidade: Biólogo
Considerando as propriedades ópticas e as aplicações das diferentes modalidades de microscopia ao domínio das ciências ambientais e biológicas, julgue o item a seguir.Na microscopia de epifluorescência, a luz de excitação atinge a amostra por cima, através da objetiva, e o espelho dicróico tem a função de refletir comprimentos de onda curtos para a amostra e permitir a passagem de comprimentos de onda longos (fluorescência) para as oculares.
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GabaritoC — Certo
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Microscopia de epifluorescência: princípio óptico e função do espelho dicróico
Gabarito: CERTO. A afirmativa descreve corretamente o funcionamento da microscopia de epifluorescência: a luz de excitação incide pela objetiva (epi-iluminação) e o espelho dicróico reflete os comprimentos de onda curtos (excitação) em direção à amostra, enquanto permite a passagem dos comprimentos de onda longos (emissão/fluorescência) para as oculares. Esse é o princípio fundamental da técnica, amplamente descrito em manuais de microscopia e biologia celular.
A microscopia de epifluorescência é uma variação da microscopia de fluorescência em que a iluminação e a observação ocorrem pelo mesmo lado da amostra, ou seja, pela objetiva. Isso é possível graças ao espelho dicróico, um componente óptico que atua como um divisor de feixe seletivo por comprimento de onda. A luz de excitação, geralmente de comprimento de onda curto (como ultravioleta ou azul), é refletida pelo espelho dicróico em direção à amostra, atravessando a objetiva. Ao atingir a amostra, os fluoróforos presentes absorvem essa energia e emitem luz de comprimento de onda maior (fluorescência). Essa luz emitida, por ter comprimento de onda mais longo, atravessa o espelho dicróico e segue para as oculares, formando a imagem. Esse arranjo evita que a luz de excitação chegue ao observador, garantindo que apenas a fluorescência seja visualizada.
A banca explora a compreensão do papel do espelho dicróico e da direção da luz. A afirmativa está correta ao afirmar que a luz de excitação atinge a amostra por cima, através da objetiva, e que o espelho dicróico reflete comprimentos de onda curtos e permite a passagem dos longos. Essa é a descrição clássica do funcionamento da epifluorescência, utilizada em técnicas como imunofluorescência e FISH (hibridização in situ por fluorescência).
1Excitação (onda curta)
2Espelho dicróico reflete
3Objetiva → amostra
4Fluoróforo emite (onda longa)
5Espelho transmite → ocular
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NÃO CAIA NESSA!
A banca poderia inverter os papéis do espelho dicróico, afirmando que ele reflete os comprimentos de onda longos e permite a passagem dos curtos. Essa inversão é uma armadilha comum, pois o princípio físico é exatamente o oposto: o espelho reflete a excitação (curta) e transmite a emissão (longa). Fique atento a essa troca em questões sobre microscopia de fluorescência.
✅ CERTO. A afirmativa está correta e corresponde ao funcionamento real da microscopia de epifluorescência.