Questão de Biologia — Moléculas, células e tecidos — CESPE / CEBRASPE 2026

Microscopia de contraste de fase

Gabarito: letra C (CERTO). O microscópio de contraste de fase, de fato, permite observar células vivas e não coradas, convertendo diferenças de fase da luz — causadas por variações no índice de refração da amostra — em diferenças de intensidade luminosa, utilizando um diafragma anular e uma placa de fase. Essa é a descrição correta do princípio de funcionamento dessa técnica.

O microscópio de contraste de fase é uma variação do microscópio óptico que explora as propriedades ondulatórias da luz. Quando a luz atravessa uma célula viva, ela sofre refração de maneira diferente em cada região, dependendo do índice de refração local (núcleo, citoplasma, organelas). Essas diferenças de índice de refração alteram a fase da onda luminosa, mas o olho humano não consegue perceber diferenças de fase — apenas diferenças de intensidade (amplitude) e cor (comprimento de onda).

O sistema óptico do contraste de fase resolve exatamente esse problema: um diafragma anular (colocado no condensador) transforma a luz em um cone oco, e uma placa de fase (na objetiva) desloca a fase da luz que não interage com a amostra em relação à luz que é difratada pela amostra. A interferência entre esses dois feixes converte a diferença de fase em diferença de amplitude (intensidade), gerando contraste na imagem. Por isso, estruturas transparentes e incolores, como células vivas, tornam-se visíveis sem necessidade de coloração — o que é essencial para observar processos dinâmicos em células vivas, como divisão celular e movimento.

A pegadinha da banca aqui é justamente a inversão do mecanismo: muitos candidatos confundem o contraste de fase com outras técnicas, como a microscopia de campo claro (que exige coloração) ou a de fluorescência (que usa marcadores fluorescentes). A afirmativa, no entanto, descreve com precisão o funcionamento do contraste de fase, incluindo os componentes ópticos específicos (diafragma anular e placa de fase).

Alternativa C — ✅ Correta ⟵ GABARITO

A afirmativa está correta porque descreve fielmente o princípio do microscópio de contraste de fase:

• Observação de células vivas e não coradas: é a principal aplicação dessa técnica, pois não requer fixação nem coloração, que matariam a célula.

• Conversão de diferenças de fase em diferenças de intensidade: é exatamente o que o sistema faz, aproveitando as variações de índice de refração da amostra.

• Diafragma anular e placa de fase: são os componentes ópticos característicos que realizam essa conversão.

Portanto, o item está CERTO.

Gabarito: letra C (CERTO).