Questão de Biologia — Cultura de Células — CESPE / CEBRASPE 2025
Biologia›Cultura de Células
Código
ce406496
Banca
CESPE / CEBRASPE
Órgão
EMBRAPA
Ano
2025
Cargo
Pesq ( )
O gráfico acima apresenta os dados de crescimento bacteriano em sistema fechado (batelada) de diferentes isolados e linhagens. Os cinco cultivos foram realizados simultaneamente, em frascos separados e nas mesmas condições de espaço, volume, temperatura, agitação e meio de cultivo. A aferição do crescimento foi realizada a cada hora, no período total de 24 h, pela medição da turbidez do meio de cultivo líquido no comprimento de ondas de 600 nm. Os isolados selvagens A, B e C são da mesma espécie, mas foram obtidos de solos de diferentes regiões do Brasil. Após o sequenciamento e a comparação dos genomas dos 3 isolados, foi identificada uma deleção de 3 aminoácidos no sítio ativo da enzima X do isolado A e a inserção de um transposon na região 3` do gene codificante de uma bomba de H+ (prótons) da membrana citoplasmática do isolado B. O isolado C foi modificado por engenharia genética com a deleção dos mesmos 3 aminoácidos que são ausentes no sítio ativo da enzima X do isolado A, gerando a linhagem mutante D. O isolado C também foi modificado com a inserção do transposon observado no isolado B, no mesmo locus, gerando a linhagem mutante E.
Considerando as informações contidas no gráfico e no texto anteriormente apresentados, julgue o item a seguir.
Com 14 h de cultivo a densidade celular do isolado A é menor que a da linhagem E, mas não é possível aferir a viabilidade celular dessas duas culturas, nesse ponto das curvas, utilizando-se esse método de quantificação.
CCerto
EErrado
Revelar gabarito e comentário▾
GabaritoC — Certo
Comentário gerado por IA. É um apoio ao estudo, ancorado em fontes, mas pode conter imprecisões — confira sempre na fonte oficial (lei, súmula, edital e gabarito da banca). Encontrou um erro? Use “Reportar”.
Curva de crescimento bacteriano e turbidimetria
Gabarito: CERTO. A turbidimetria (medição da densidade óptica a 600 nm) quantifica a densidade celular total — células vivas e mortas —, de modo que, embora seja possível comparar a densidade celular do isolado A e da linhagem E às 14 h, esse método não permite aferir a viabilidade celular (proporção de células vivas) nesse ponto da curva. A afirmativa está correta porque distingue corretamente o que a turbidez mede (biomassa total) do que ela não mede (viabilidade).
A curva de crescimento bacteriano em sistema fechado (batelada) apresenta fases características: lag (adaptação), log ou exponencial (crescimento máximo), estacionária (equilíbrio entre células vivas e mortas) e declínio (morte celular). A turbidimetria, também chamada de espectrofotometria, mede a quantidade de luz espalhada pelas células em suspensão: quanto maior a densidade celular, maior a turbidez e, portanto, maior a absorbância (ou densidade óptica, DO) medida. Esse método é rápido, não destrutivo e permite acompanhar o crescimento ao longo do tempo, mas tem uma limitação fundamental: ele não distingue células vivas de células mortas, pois ambas dispersam a luz. Uma célula morta intacta contribui para a turbidez tanto quanto uma viva.
Para aferir a viabilidade celular, seria necessário utilizar métodos que detectam atividade metabólica ou capacidade de reprodução, como a contagem de unidades formadoras de colônias (UFC) em placa, a coloração com corantes vitais (que penetram apenas em células mortas) ou a medição de atividade metabólica (como a redução de sais de tetrazólio). Esses métodos são complementares à turbidimetria e respondem a perguntas diferentes: a turbidez responde "quantas células há?" (densidade total), enquanto a viabilidade responde "quantas estão vivas?" (densidade de células viáveis).
No contexto da questão, os isolados A, B e C são da mesma espécie, mas apresentam mutações distintas: o isolado A tem uma deleção de 3 aminoácidos no sítio ativo da enzima X, e o isolado B tem a inserção de um transposon no gene de uma bomba de H+ da membrana. As linhagens D e E foram geradas por engenharia genética a partir do isolado C, reproduzindo as mutações de A e B, respectivamente. Essas diferenças genéticas podem afetar o crescimento, mas a comparação da densidade celular às 14 h, feita por turbidimetria, reflete apenas a biomassa total acumulada, não a saúde metabólica das células.
A pegadinha da questão está em confundir densidade celular (o que a turbidimetria mede) com viabilidade celular (o que ela não mede). O candidato pode ser tentado a afirmar que, como a turbidez mede células totais, ela também informa sobre a viabilidade — o que é incorreto. A distinção entre esses dois conceitos é o critério decisivo para julgar a afirmativa.
1Lag (adaptação)
2Log (exponencial)
3Estacionária
4Declínio (morte)
LEVEL · soulevel.com.br
Item — ✅ CERTO
A afirmativa é correta por dois motivos: (1) às 14 h de cultivo, a densidade celular do isolado A é menor que a da linhagem E, conforme o gráfico (a curva de E está acima da de A nesse ponto); (2) a turbidimetria, método utilizado, mede a densidade celular total (células vivas e mortas), mas não permite aferir a viabilidade celular, pois não distingue células vivas de mortas. A afirmativa reconhece corretamente essa limitação do método, o que a torna verdadeira.
PEGA ESSA DICA!
Na prova, quando a questão mencionar turbidimetria ou densidade óptica (DO), lembre-se: ela mede biomassa total, não viabilidade. Para viabilidade, procure termos como UFC, contagem em placa, corantes vitais ou atividade metabólica. Essa distinção é clássica em questões de microbiologia.
