GabaritoE — Errado
Gabarito: ERRADO (letra E). A leitura da coloração de Gram exige o uso de óleo de imersão, pois as bactérias são estruturas muito pequenas (da ordem de micrômetros) e precisam ser observadas com a objetiva de imersão (geralmente 100x), que proporciona maior aumento e resolução. A objetiva de 10x não permite a visualização adequada das bactérias para a avaliação da morfologia e do arranjo, elementos essenciais na interpretação da coloração de Gram.
A coloração de Gram é uma técnica fundamental em microbiologia, desenvolvida por Hans Christian Gram em 1884, que classifica as bactérias em dois grandes grupos: Gram-positivas e Gram-negativas, com base na estrutura da parede celular. As bactérias Gram-positivas possuem uma espessa camada de peptidoglicano que retém o cristal violeta, corando-se em roxo/azul; as Gram-negativas possuem uma fina camada de peptidoglicano e uma membrana externa rica em lipopolissacarídeos, que não retém o cristal violeta, sendo coradas pelo contracorante (fucsina ou safranina) em rosa/vermelho.
A observação ao microscópio óptico requer a utilização de óleo de imersão quando se usa a objetiva de 100x (aumento total de 1000x). O óleo de imersão tem o mesmo índice de refração do vidro, o que evita a dispersão dos raios luminosos e aumenta a resolução da imagem. Sem o óleo, a imagem fica borrada e com baixa nitidez, impossibilitando a análise precisa das características morfológicas e tintoriais das bactérias. A objetiva de 10x (aumento total de 100x) é utilizada para a varredura inicial da lâmina, mas não permite distinguir as bactérias individualmente, apenas visualizar a presença de material corado em campo.
Na prática, o procedimento correto é: após a coloração, a lâmina é examinada inicialmente com a objetiva de 10x para localizar o esfregaço e verificar a distribuição do material; em seguida, adiciona-se uma gota de óleo de imersão sobre a área a ser observada e gira-se o revólver para a objetiva de 100x. É nessa objetiva que se faz a leitura da coloração de Gram, avaliando a forma (cocos, bacilos, espirilos etc.), o arranjo (cachos, cadeias, pares etc.) e a cor (roxo ou rosa).
A banca explora aqui um erro comum: acreditar que a coloração de Gram pode ser lida em aumentos menores, como 10x ou 40x. Isso é incorreto, pois a resolução necessária para distinguir bactérias (que medem cerca de 0,5 a 5 micrômetros) só é alcançada com a objetiva de imersão. Portanto, a afirmação do item está errada ao dispensar o óleo de imersão e indicar a objetiva de 10x.
A banca inverte o procedimento padrão: afirma que a leitura é feita sem óleo de imersão e com objetiva de 10x, quando o correto é usar óleo de imersão e objetiva de 100x. O candidato que não domina a rotina laboratorial pode cair na armadilha de achar que a objetiva de 10x é suficiente para visualizar bactérias.
A afirmação está incorreta porque a leitura da coloração de Gram exige o uso de óleo de imersão e a objetiva de 100x. A objetiva de 10x não proporciona aumento nem resolução suficientes para visualizar as bactérias individualmente e avaliar suas características morfológicas e tintoriais. O óleo de imersão é indispensável para evitar a refração da luz e obter uma imagem nítida em alto aumento.
Gabarito: ERRADO (letra E).
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