Questão de Biologia — Métodos de Identificação de Parasitos — CESPE / CEBRASPE 2025

Fixadores e conservantes em amostras parasitológicas: Ziehl-Neelsen

Gabarito: ERRADO (letra E). A técnica de Ziehl-Neelsen modificada, utilizada para a pesquisa de oocistos de coccídeos intestinais, pode ser realizada em fezes conservadas, desde que o conservante utilizado seja compatível (como o formol a 10% ou o SAF). A afirmação de que ela "requer amostras frescas e não pode ser realizada em fezes conservadas" é, portanto, incorreta.

A coloração de Ziehl-Neelsen é uma técnica de coloração diferencial, originalmente desenvolvida para a identificação de micobactérias (bacilos álcool-ácido resistentes), mas que, em sua versão modificada, é amplamente empregada na parasitologia para a detecção de oocistos de coccídeos intestinais, como Cryptosporidium parvum, Cystoisospora belli (antiga Isospora belli) e Cyclospora cayetanensis. Esses parasitos eliminam oocistos nas fezes, e a coloração permite visualizá-los ao microscópio, corando-os em tons de rosa ou vermelho sobre um fundo contrastante.

A questão central aqui é a relação entre a técnica de coloração e a necessidade de amostras frescas. Embora seja verdade que, para a pesquisa de trofozoítos (formas vegetativas de protozoários, como a Entamoeba histolytica e a Giardia lamblia), as fezes devam ser frescas ou preservadas em conservantes específicos, o mesmo não se aplica aos oocistos de coccídeos. Os oocistos são formas de resistência, com parede espessa, que sobrevivem no ambiente e são menos lábeis que os trofozoítos. Por isso, as fezes podem ser conservadas em fixadores como o formol a 10%, o SAF (acetato de sódio, ácido acético e formol) ou o MIF (mercúrio, iodo e formol) antes da realização da coloração de Ziehl-Neelsen. Na prática, a conservação da amostra em formol a 10% é um procedimento comum e recomendado, pois permite o transporte e o processamento da amostra em momento posterior, sem comprometer a detecção dos oocistos.

A confusão que a banca explora é a generalização da necessidade de "amostras frescas" para todas as técnicas parasitológicas. Essa necessidade é específica para a pesquisa de formas vegetativas (trofozoítos) e de larvas de Strongyloides stercoralis, que se degeneram rapidamente. Para a pesquisa de cistos e oocistos, a conservação é perfeitamente viável. O erro da afirmativa está em afirmar categoricamente que a técnica "não pode ser realizada em fezes conservadas", quando, na verdade, ela pode e frequentemente é realizada dessa forma.

Guarde a distinção: trofozoítos exigem amostras frescas ou conservantes especiais; cistos e oocistos toleram conservação em formol ou SAF. É exatamente essa fronteira que a questão testa.

Alternativa E — ❌ Incorreta (Gabarito)

A afirmativa está errada porque a coloração de Ziehl-Neelsen modificada pode ser realizada em fezes conservadas. O erro está na generalização de que a técnica "requer amostras frescas e não pode ser realizada em fezes conservadas". Conforme a prática laboratorial e as recomendações técnicas, as fezes podem ser preservadas em conservantes como formol a 10%, SAF ou MIF, e ainda assim os oocistos de coccídeos podem ser detectados pela coloração de Ziehl-Neelsen. A necessidade de amostras frescas é específica para a pesquisa de trofozoítos e larvas, não para oocistos.

Gabarito: letra E (ERRADO).