Questão de Biologia — Métodos de Identificação de Bactérias — FGV 2025

Controle do crescimento microbiano in vitro

Gabarito: letra A. A autoclave é o método de esterilização por calor úmido sob pressão, e o ciclo padrão de funcionamento é de 15 psi (libras por polegada quadrada) a 121,5 °C por 20 minutos — condições suficientes para destruir até os endósporos bacterianos, as estruturas mais resistentes conhecidas. As demais alternativas apresentam erros conceituais sobre os métodos de controle microbiano: refrigeração apenas inibe o crescimento (não mata), filtros removem micróbios de líquidos (são eficazes para esterilização), anaeróbios e microaerófilos são justamente os que sobrevivem sem oxigênio, e assepsia não destrói endósporos (é apenas prevenção de contaminação).

O controle do crescimento microbiano in vitro é um tema central da microbiologia e da biossegurança laboratorial. Para entender a questão, é preciso dominar a diferença entre os três níveis de ação sobre microrganismos: esterilização (destruição ou eliminação de TODAS as formas de vida, incluindo endósporos), desinfecção (destruição de microrganismos patogênicos em formas vegetativas, mas não necessariamente endósporos) e assepsia (conjunto de medidas para PREVENIR a contaminação, não para destruir microrganismos). A autoclave é o método mais confiável de esterilização, pois o calor úmido sob pressão desnatura proteínas e enzimas de forma irreversível, atingindo até os endósporos — que são estruturas de resistência formadas por bactérias dos gêneros Clostridium e Bacillus em condições ambientais desfavoráveis, como falta de nutrientes ou água. O endósporo é capaz de permanecer anos com atividade metabólica suspensa, resistindo ao calor intenso, à falta de água e a outras condições adversas, o que o torna o principal desafio para a esterilização.

A refrigeração, por sua vez, é um método bacteriostático (inibe o crescimento), não bactericida (não mata). A baixa temperatura reduz a atividade metabólica e a velocidade de multiplicação, mas não elimina os microrganismos — por isso alimentos refrigerados estragam eventualmente. A filtração é um método físico de esterilização de líquidos e gases: filtros com poros de tamanho apropriado (geralmente 0,22 µm) retêm bactérias, fungos e até alguns vírus, sendo amplamente utilizados para esterilizar soluções termossensíveis (que não podem ser aquecidas). Quanto à atmosfera, microrganismos aeróbios exigem oxigênio para crescer; microaerófilos precisam de baixas concentrações de O₂; anaeróbios obrigatórios morrem na presença de oxigênio. Portanto, colocar aeróbios e microaerófilos em atmosfera desprovida de oxigênio inibe ou impede seu crescimento, mas não necessariamente os mata — a alternativa D inverte esse raciocínio. Por fim, a assepsia é um conjunto de procedimentos que visam impedir a contaminação (como lavagem das mãos, uso de luvas e flambagem de alças), mas não tem poder de destruir endósporos — para isso, é necessária a esterilização.

A pegadinha central desta questão é a distinção entre os métodos que matam (esterilização, desinfecção) e os que apenas inibem (refrigeração, congelamento, dessecação) ou previnem (assepsia). A banca explora exatamente essa confusão: o candidato que não domina a diferença entre bacteriostático e bactericida, ou entre assepsia e esterilização, tende a marcar alternativas incorretas. Guarde o critério decisivo: a autoclave é o padrão-ouro da esterilização por calor úmido, e seus parâmetros (121,5 °C, 15 psi, 20 min) são os valores clássicos cobrados em provas — é nesse ponto que as alternativas se dividem.

Alternativa A — ✅ Correta ⟵ GABARITO

A alternativa descreve corretamente o ciclo padrão de funcionamento da autoclave: 20 minutos a 15 psi e 121,5 °C. Esses são os parâmetros clássicos de esterilização por calor úmido sob pressão, capazes de destruir todas as formas de vida microbiana, incluindo os endósporos bacterianos. A pressão de 15 psi eleva o ponto de ebulição da água para 121,5 °C, temperatura suficiente para desnaturar proteínas e enzimas de forma irreversível. É o método mais eficaz e confiável de esterilização em laboratórios e hospitais.

Alternativa B — ❌ Incorreta

A refrigeração não mata microrganismos; ela apenas inibe seu crescimento (efeito bacteriostático). A baixa temperatura reduz a atividade metabólica e a velocidade de multiplicação, mas não elimina as células. Microrganismos psicrófilos, inclusive, conseguem crescer em temperaturas de refrigeração. Para matar, seria necessário calor (esterilização), agentes químicos (desinfecção) ou radiação.

Alternativa C — ❌ Incorreta

A afirmação está invertida: filtros com poros de tamanho apropriado (0,22 µm) são capazes de remover todos os micróbios de líquidos, incluindo bactérias, fungos e a maioria dos vírus. A filtração é um método físico de esterilização amplamente utilizado para soluções termossensíveis. O que não pode ser removido por filtração são vírus muito pequenos ou micoplasmas, mas a alternativa afirma o contrário do que é verdadeiro — a filtração é, sim, um método eficaz de remoção microbiana.

Alternativa D — ❌ Incorreta

A alternativa inverte a relação entre microrganismos e oxigênio. Aeróbios exigem oxigênio para crescer; microaerófilos precisam de baixas concentrações de O₂. Ao colocá-los em atmosfera desprovida de oxigênio, seu crescimento é inibido ou impedido — mas isso não significa que sejam mortos. A ausência de oxigênio é bacteriostática para aeróbios, não bactericida. A alternativa afirma que eles "não são mortos", o que é verdadeiro, mas a redação sugere que eles sobrevivem normalmente, o que é falso — eles não conseguem se multiplicar sem oxigênio.

Alternativa E — ❌ Incorreta

A assepsia é um conjunto de medidas para prevenir a contaminação (lavagem das mãos, uso de luvas, flambagem de alças), mas não tem poder de destruir endósporos. Endósporos são as estruturas mais resistentes conhecidas e só podem ser destruídos por esterilização — calor úmido (autoclave), calor seco (estufa), radiação ou agentes químicos esterilizantes (como óxido de etileno). A assepsia não é um método de destruição microbiana, mas de prevenção.

Gabarito: letra A