Questão de Biologia — Hereditariedade e diversidade da vida — UFSCAR 2023
BiologiaHereditariedade e diversidade da vida
- Código
- qg046460
- Banca
- UFSCAR
- Órgão
- UFSCAR
- Ano
- 2023
- Nível
- Médio
- Cargo
- Técnico de Laboratório - Biologia
Durante uma aula prática de biologia molecular, os estudantes desenharam um par de primers para amplificação e clonagem de um gene de interesse em um plasmídeo para expressão heteróloga em bactéria. Para o desenho dos primers os estudantes utilizaram a sequência do gene de interesse e do mapa de restrição do plasmídeo. Após amplificação com os primers, o produto de PCR resolvido em um gel de agarose apresentou tamanho esperado. Em seguida, purificou-se este fragmento do gel e realizou-se a digestão com as enzimas de restrição escolhidas e ao avaliar a digestão em um gel de agarose, observou-se a formação de 4 fragmentos de tamanhos menores que o esperado. Qual a causa provável deste resultado?
- AA purificação do DNA do gel de agarose promoveu a sua fragmentação por causa de contaminação com RNAse.
- BAs enzimas de restrição ao serem colocadas juntas, alteraram sua conformação e com isso seus sítios de restrição foram alterados e elas digeriram o DNA de forma aleatória.
- COs estudantes não avaliaram se havia sítios de restrição das enzimas escolhidas na sequência de DNA do gene de interesse.
- DApós a purificação, os fragmentos de DNA formaram estruturas secundárias que são fatores essenciais no reconhecimento das enzimas de restrição aos seus sítios-alvo no DNA.
- EOs estudantes deixaram as enzimas digerindo o fragmento de DNA por muito tempo e isso alterou a especificidade das enzimas de restrição utilizadas.