Questão de Biomedicina - Análises Clínicas — Biologia Molecular em Biomedicina — VUNESP 2024

Biópsia líquida e DNA tumoral circulante

Gabarito: letra A. A técnica descrita no enunciado — análise de fragmentos de DNA liberados na corrente sanguínea por células tumorais em morte — é a biópsia líquida, um método minimamente invasivo que detecta o DNA tumoral circulante (ctDNA) para diagnóstico, prognóstico e monitoramento terapêutico. As demais alternativas referem-se a outras técnicas laboratoriais (sequenciamento, imunofenotipagem, citometria e hibridização), que não correspondem à definição apresentada.

A biópsia líquida é um avanço da oncologia de precisão que permite analisar material genético tumoral sem a necessidade de um procedimento invasivo como a biópsia tradicional (cirúrgica ou por agulha). Quando células tumorais morrem — por apoptose ou necrose —, fragmentos de DNA são liberados na corrente sanguínea, formando o chamado DNA livre circulante (cfDNA). Em pacientes com tumores sólidos, parte desse cfDNA é de origem tumoral (ctDNA) e carrega as mutações e alterações genéticas específicas do câncer. A biópsia líquida consiste justamente em coletar uma amostra de sangue periférico e analisar esse ctDNA, permitindo identificar mutações, monitorar a resposta ao tratamento, detectar resistência a drogas e acompanhar a progressão da doença em tempo real.

O conceito central é a detecção de biomarcadores tumorais circulantes — não apenas o DNA, mas também RNA, proteínas e vesículas extracelulares — a partir de um exame de sangue. Isso contrasta com a biópsia sólida, que exige a obtenção de tecido tumoral. A biópsia líquida é particularmente útil quando a biópsia convencional é de difícil acesso, arriscada ou quando se deseja monitorar a evolução tumoral ao longo do tempo, capturando a heterogeneidade genética do câncer.

Na prática, o fluxo de trabalho envolve: coleta de sangue em tubo específico (com preservativo de cfDNA), centrifugação para separar o plasma, extração do DNA circulante e análise por técnicas sensíveis como PCR digital ou sequenciamento de nova geração (NGS). O resultado permite, por exemplo, identificar mutações no gene EGFR em câncer de pulmão para indicar terapia-alvo, ou detectar mutações de resistência que orientam a troca de tratamento.

A distinção que importa aqui é entre a biópsia líquida (que analisa o que está circulando no sangue) e as técnicas de análise molecular que podem ser usadas dentro dela (como o sequenciamento) ou que analisam células/tecidos diretamente (como a imunofenotipagem e a hibridização). A biópsia líquida é o conceito clínico; as demais são ferramentas laboratoriais que podem ou não ser empregadas nesse contexto. A banca explora exatamente essa confusão: o candidato que conhece as técnicas, mas não o conceito integrador, tende a marcar uma das ferramentas.

Guarde a fronteira: biópsia líquida = análise de material tumoral circulante no sangue (ctDNA/cfDNA); as outras alternativas são técnicas específicas de biologia molecular ou hematologia que não definem o conceito apresentado. É nesse critério que as alternativas se separam.

Alternativa A — ✅ Correta ⟵ GABARITO

A alternativa descreve exatamente a biópsia líquida: a análise de fragmentos de DNA tumoral liberados na corrente sanguínea (ctDNA) para fins de diagnóstico, prognóstico e monitoramento terapêutico. O termo "biópsia" é usado porque se obtém informação genética do tumor, mas de forma não invasiva, a partir do sangue. É o conceito central do enunciado.

Alternativa B — ❌ Incorreta

O sequenciamento genômico é uma técnica laboratorial que determina a ordem das bases nitrogenadas no DNA. Embora possa ser utilizado dentro de uma biópsia líquida para analisar o ctDNA, ele não é o nome do conceito descrito — é uma ferramenta. O enunciado pergunta pelo avanço técnico como um todo, que é a biópsia líquida, não pela técnica específica de análise.

Alternativa C — ❌ Incorreta

A imunofenotipagem é uma técnica que identifica e quantifica populações celulares com base na expressão de antígenos de superfície, tipicamente por citometria de fluxo. É amplamente usada no diagnóstico de leucemias e linfomas, analisando células intactas, não fragmentos de DNA livre circulante. Não corresponde à definição apresentada.

Alternativa D — ❌ Incorreta

A citometria de fluxo é uma técnica que analisa propriedades físicas e químicas de células ou partículas em suspensão, como tamanho, granulosidade e fluorescência. É usada para imunofenotipagem, contagem celular e análise de ciclo celular. Não se aplica à detecção de DNA livre circulante no sangue, que é o foco do enunciado.

Alternativa E — ❌ Incorreta

A hibridização in situ (FISH, por exemplo) é uma técnica que detecta sequências específicas de DNA ou RNA dentro de células ou tecidos, utilizando sondas marcadas com fluorescência. É usada para identificar alterações cromossômicas e rearranjos gênicos em amostras de tecido ou células. Não analisa DNA livre circulante no sangue.

Gabarito: letra A