O termociclador é um equipamento que automatiza o processo de amplificação de uma sequência específica de DNA a partir de uma pequena amostra. Ele eleva e reduz a temperatura do bloco nos ciclos de calor com tempo e temperaturas pré-programados, realizando os ciclos da PCR.De acordo com os ciclos de calor descritos na imagem a seguir, a nomenclatura correta das Etapas 1, 2 e 3, respectivamente, é:(Fabriação de um termociclador automático – Unijuí 2017)
AHibridização; Separação e Elongação.
BDesnaturação; Anelamento e Extensão.
CExtensão; Desnaturação e Ligação.
DAcoplamento; Polimerização e Fusão.
ESeparação; Ligação e Extensão.
Revelar gabarito e comentário▾
GabaritoB — Desnaturação; Anelamento e Extensão.
Comentário gerado por IA. É um apoio ao estudo, ancorado em fontes, mas pode conter imprecisões — confira sempre na fonte oficial (lei, súmula, edital e gabarito da banca). Encontrou um erro? Use “Reportar”.
Ciclos da PCR: Desnaturação, Anelamento e Extensão
Gabarito: letra B. A PCR (Reação em Cadeia da Polimerase) é composta por três etapas térmicas cíclicas, na ordem: Desnaturação (alta temperatura, ~94–95 °C, separa as fitas do DNA), Anelamento (temperatura intermediária, ~50–65 °C, os primers se ligam às fitas-molde) e Extensão (temperatura ótima da polimerase, ~72 °C, síntese da nova fita). A alternativa B nomeia corretamente as Etapas 1, 2 e 3 da figura.
A PCR é uma técnica de biologia molecular que amplifica exponencialmente uma sequência específica de DNA, e o termociclador é o equipamento que automatiza os ciclos de temperatura necessários. Cada ciclo completo de PCR envolve três passos fundamentais, que se repetem de 25 a 40 vezes para gerar milhões de cópias do fragmento-alvo. Compreender a função de cada etapa e a temperatura associada é essencial não só para responder esta questão, mas para dominar o princípio da técnica.
Etapa 1 — Desnaturação: a mistura reacional é aquecida a aproximadamente 94–95 °C. Nessa temperatura, as pontes de hidrogênio entre as bases nitrogenadas das duas fitas do DNA são rompidas, fazendo com que a dupla hélice se separe em duas fitas simples. Essa separação é necessária para que os primers e a DNA polimerase tenham acesso às sequências-alvo. É uma etapa física, que não envolve atividade enzimática.
Etapa 2 — Anelamento (ou Hibridização): a temperatura é reduzida para cerca de 50–65 °C, permitindo que os oligonucleotídeos iniciadores (primers) se liguem (hibridizem) por complementaridade de bases às sequências específicas nas fitas-molde. A temperatura exata depende do comprimento e da composição de bases dos primers (teor de GC). O anelamento é crucial para a especificidade da reação: se a temperatura for muito baixa, pode haver ligação inespecífica; se for muito alta, os primers podem não se ligar.
Etapa 3 — Extensão (ou Elongação): a temperatura é elevada para cerca de 72 °C, a temperatura ótima de atividade da DNA polimerase termoestável (como a Taq polimerase). A enzima adiciona nucleotídeos complementares à fita-molde a partir da extremidade 3' do primer, sintetizando uma nova fita de DNA. Ao final da extensão, cada molécula de DNA duplicou, e o ciclo recomeça.
A nomenclatura correta das etapas é um conhecimento fundamental e direto da técnica de PCR. A banca explora a confusão entre os termos sinônimos e as traduções: "Anelamento" e "Hibridização" são sinônimos (Etapa 2), assim como "Extensão" e "Elongação" (Etapa 3). A pegadinha está em trocar a ordem ou usar termos menos consagrados, como "Separação" no lugar de "Desnaturação" ou "Ligação" no lugar de "Extensão".
Guarde a sequência lógica: quente → separa (Desnaturação) → morno → liga primers (Anelamento) → ótimo → polimeriza (Extensão). É exatamente essa ordem que as alternativas tentam embaralhar.
1Desnaturação (94–95 °C)Separa as fitas de DNA
2Anelamento (50–65 °C)Primers ligam às fitas-molde
3Extensão (72 °C)Polimerase sintetiza nova fita
LEVEL · soulevel.com.br
Alternativa A — ❌ Incorreta
A ordem "Hibridização; Separação e Elongação" está errada. A primeira etapa da PCR é a Desnaturação (separação das fitas), não a hibridização. Além disso, "Hibridização" é sinônimo de Anelamento, que é a segunda etapa, e "Separação" não é o termo técnico consagrado para a primeira etapa (o correto é Desnaturação). A alternativa mistura os termos e inverte a ordem correta.
Alternativa B — ✅ Correta ⟵ GABARITO
A alternativa B apresenta exatamente a nomenclatura correta e na ordem correta das três etapas da PCR: Desnaturação (Etapa 1), Anelamento (Etapa 2) e Extensão (Etapa 3). Esses são os termos técnicos padrão utilizados na literatura e na prática laboratorial para descrever os ciclos de temperatura do termociclador.
Alternativa C — ❌ Incorreta
A alternativa C começa com "Extensão", que é a terceira etapa, e não a primeira. A ordem correta é Desnaturação → Anelamento → Extensão. Além disso, "Ligação" não é o termo técnico para a terceira etapa (o correto é Extensão ou Elongação). A alternativa está completamente fora de ordem e usa terminologia inadequada.
Alternativa D — ❌ Incorreta
"Acoplamento; Polimerização e Fusão" não corresponde à nomenclatura padrão das etapas da PCR. "Acoplamento" não é sinônimo de Anelamento, "Polimerização" é um termo genérico que não é o consagrado para a etapa de síntese (o correto é Extensão), e "Fusão" não é o termo para a separação das fitas (o correto é Desnaturação). A alternativa usa termos não técnicos ou de outras áreas.
Alternativa E — ❌ Incorreta
"Separação; Ligação e Extensão" está parcialmente correta no último termo, mas erra nos dois primeiros. "Separação" não é o termo técnico para a primeira etapa (o correto é Desnaturação), e "Ligação" não é o termo para a segunda etapa (o correto é Anelamento ou Hibridização). A alternativa usa termos genéricos que não são os consagrados na biologia molecular.
NÃO CAIA NESSA!
A banca explora a confusão entre os sinônimos e os termos técnicos. "Anelamento" e "Hibridização" são a mesma coisa (Etapa 2), assim como "Extensão" e "Elongação" (Etapa 3). O candidato que conhece os sinônimos pode se confundir com alternativas que usam um termo sinônimo no lugar errado, como a alternativa A, que coloca "Hibridização" como primeira etapa. A ordem é fixa: Desnaturação → Anelamento → Extensão. Memorize a sequência e os sinônimos para não cair nessa troca.
PEGA ESSA DICA!
Para fixar a ordem das etapas da PCR, associe cada uma à sua função e temperatura: Desnaturação (94–95 °C, "derrete" o DNA), Anelamento (50–65 °C, primers "grudam"), Extensão (72 °C, polimerase "copia"). Na prova, se a alternativa trouxer "Separação", "Ligação", "Fusão" ou "Polimerização" no lugar dos termos técnicos, desconfie — a banca está testando se você conhece a nomenclatura correta.
(Fabriação de um termociclador automático – Unijuí 2017)