Questão de Técnicas em Laboratório — Técnicas Bioquímicas Indicadas no Diagnóstico de Diversas Patologias Humanas — VUNESP 2024
Técnicas em LaboratórioTécnicas Bioquímicas Indicadas no Diagnóstico de Diversas Patologias Humanas
- Código
- vu089135
- Banca
- VUNESP
- Órgão
- UNICAMP
- Ano
- 2024
- Nível
- Superior
- Cargo
- Profissional de Pesquisa, Engenharia e Tecnologia
A técnica de Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) é amplamente utilizada para amplificar seguimentos específicos de DNA, mas podem ocorrer problemas de baixa eficiência de amplificação, o que resulta em quantidades insuficientes de produtos de PCR. Esses problemas mencionados relacionam-se com as condições da reação, como, por exemplo, temperatura de anelamento e concentração dos primers.Considerando-se os fatores críticos que afetam a eficiência da PCR, qual das seguintes alternativas descreve corretamente uma abordagem para otimizar a reação?
- AUtilizar uma concentração correta de dNTPs, geralmente 200 µM cada, melhora a eficiência e fidelidade da PCR.
- BAumentar a concentração de MgCl₂ estabiliza a ligação dos primers ao DNA molde, aumentando a eficiência da PCR.
- CDiminuir a temperatura de denaturação para 85 ºC melhora a separação das fitas de DNA e aumenta a eficiência da PCR.
- DAumentar a temperatura de anelamento entre 5-10 ºC acima da Tm (temperatura de melting) dos primers aumenta a eficiência da PCR.
- EReduzir o número de ciclos de PCR evita a degradação do DNA e aumenta a quantidade de produto amplificado.