Questão de Biologia — Identidade dos seres vivos — VUNESP 2024

Teste de Ames: bioensaio de mutagenicidade

Gabarito: letra C. O teste de Ames utiliza a bactéria Salmonella typhimurium (linhagens mutantes que perderam a capacidade de sintetizar histidina) para detectar substâncias com potencial mutagênico — e, por extensão, carcinogênico. É um bioensaio clássico de triagem, amplamente empregado pela indústria farmacêutica e de cosméticos.

O teste de Ames foi desenvolvido na década de 1970 pelo bioquímico Bruce Ames e se tornou um dos métodos mais utilizados para avaliar a mutagenicidade de compostos químicos. A lógica é engenhosa: utiliza-se uma linhagem de Salmonella typhimurium que é auxotrófica para histidina — ou seja, não consegue sintetizar esse aminoácido e, por isso, só cresce em meio de cultura que o contenha. Quando expostas a uma substância potencialmente mutagênica, algumas bactérias sofrem mutação reversa ("back mutation") e voltam a ser capazes de produzir histidina, formando colônias visíveis em meio sem esse aminoácido. Quanto maior o número de colônias revertentes, maior o potencial mutagênico do composto testado.

A banca explora aqui um conhecimento específico de biotecnologia e microbiologia: o organismo-modelo do teste de Ames. É uma questão de memorização direta, mas que exige distinguir a Salmonella typhimurium de outras bactérias e organismos usados em bioensaios de toxicidade. A Escherichia coli, por exemplo, é amplamente usada em biologia molecular, mas não é a cepa clássica do teste de Ames. Já a Daphnia magna e a Hydra attenuata são organismos usados em testes de toxicidade aguda em ecotoxicologia, não em mutagenicidade. A microalga Pseudokirchneriella subcapitata é usada em ensaios de toxicidade crônica em ambientes aquáticos.

Alternativa A — ❌ Incorreta

O microcrustáceo Daphnia magna é um organismo-modelo clássico em ecotoxicologia, usado para avaliar a toxicidade aguda de efluentes e substâncias químicas em ambientes aquáticos (teste de imobilidade). Não é utilizado no teste de Ames, que é um bioensaio bacteriano de mutagenicidade.

Alternativa B — ❌ Incorreta

A bactéria Escherichia coli é amplamente usada em biologia molecular e em alguns testes de mutagenicidade, mas não é a cepa padrão do teste de Ames. O teste original e mais difundido utiliza linhagens de Salmonella typhimurium.

Alternativa C — ✅ Correta ⟵ GABARITO

O teste de Ames utiliza linhagens mutantes de Salmonella typhimurium que não sintetizam histidina. A presença de um agente mutagênico provoca mutação reversa, permitindo o crescimento em meio sem histidina. É o bioensaio mais consagrado para triagem de mutagenicidade.

Alternativa D — ❌ Incorreta

O cnidário Hydra attenuata é usado em testes de toxicidade em ecotoxicologia, especialmente para avaliar efeitos de substâncias em organismos aquáticos. Não tem relação com o teste de Ames.

Alternativa E — ❌ Incorreta

A microalga Pseudokirchneriella subcapitata (atualmente Raphidocelis subcapitata) é um organismo-modelo em ensaios de toxicidade crônica e inibição de crescimento algal. Não é utilizada no teste de Ames.

Gabarito: letra C