Questão de Biologia — Moléculas, células e tecidos — VUNESP 2025
Biologia›Moléculas, células e tecidos
Código
vu091472
Banca
VUNESP
Órgão
Butantan - SP
Ano
2025
Nível
Superior
Cargo
Pesquisador Científico I - Área de Especialização: Anticorpos Monoclomais para Uso Médico
Células de ovário de hamster chinês (CHO) emergiram como a escolha predominante para a produção de anticorpos monoclonais recombinantes (rMAbs) devido a sua robustez, facilidade de transfecção e capacidade de modificações pós-traducionais semelhantes às das células humanas.Sobre o processo de expressão de anticorpos recombinantes nessas células, assinale a alternativa correta.
AO vetor de expressão não desempenha um papel fundamental na condução da expressão de rMAbs heterólogos em células CHO.
BAtualmente, os promotores proeminentes empregados em vetores de expressão de células CHO são derivados do vírus T7.
CNa modulação da expressão de gene estrangeiro (foreign gene), os íntrons têm a capacidade de aumentá-la. O íntron SV40 demonstrou o maior nível de expressão transgênica em condições de transfecção transitória e estável. Notavelmente, esse íntron também alcançou um aumento substancial na produção de proteínas recombinantes em células CHO.
DVetores bicistrônicos expressam uma única proteína do plasmídeo. Para gerar rMAbs em células CHO, dois vetores bicistrônicos separados são empregados para expressar HC e LC individualmente.
EVetores monocistrônicos permitem a expressão conjunta de LC e HC em um único mRNA, impulsionado por um único promotor. Esses vetores oferecem níveis de produção equilibrados para as proteínas LC e HC, resultando em expressão aumentada de rMAbs com agregação mínima e glicosilação consistente.
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GabaritoC — Na modulação da expressão de gene estrangeiro (foreign gene), os íntrons têm a capacidade de aumentá-la. O íntron SV40 demonstrou o maior nível de expressão transgênica em condições de transfecção transitória e estável. Notavelmente, esse íntron também alcançou um aumento substancial na produção de proteínas recombinantes em células CHO.
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Expressão de anticorpos recombinantes em células CHO
Gabarito: letra C. A alternativa C descreve corretamente que os íntrons podem aumentar a expressão de genes estrangeiros, e o íntron SV40 é um exemplo eficaz em células CHO, tanto em transfecção transitória quanto estável. As demais alternativas contêm erros conceituais sobre vetores de expressão, promotores e tipos de vetores.
Vetores de expressão em CHO
1Promotores
CMV, SV40, EF-1α (mamífero)
T7 (bacteriano/in vitro)
2Íntrons
Aumentam expressão gênica
SV40: alto nível (transitório/estável)
3Tipos de vetor
Monocistrônico
Uma proteína por mRNA
Não expressa HC+LC juntos
Bicistrônico
Duas proteínas por mRNA (IRES/2A)
Expressa HC+LC em um vetor
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Alternativa A — ❌ Incorreta
Afirma que o vetor de expressão não desempenha papel fundamental. Isso é falso: o vetor contém os elementos regulatórios (promotor, terminador, sinal de poliadenilação) e o gene de interesse, sendo essencial para a expressão do anticorpo recombinante.
Alternativa B — ❌ Incorreta
Diz que os promotores mais usados em células CHO são derivados do vírus T7. Na verdade, o promotor T7 é utilizado em sistemas de expressão bacterianos ou in vitro. Em células de mamífero (incluindo CHO), os promotores comuns são os virais CMV, SV40, EF-1α, entre outros. O promotor T7 requer a RNA polimerase T7, que não é endógena em células de mamífero.
Alternativa C — ✅ Correta ⟵ GABARITO
Afirma que os íntrons podem aumentar a expressão de genes estrangeiros, e que o íntron SV40 promove alto nível de expressão em condições transitórias e estáveis, com aumento substancial na produção de proteínas recombinantes em células CHO. Esse é um fato bem estabelecido na literatura: íntrons podem melhorar a expressão gênica por facilitar o processamento do mRNA e aumentar a exportação nuclear. O íntron SV40 é amplamente utilizado em vetores de expressão para células de mamífero.
Alternativa D — ❌ Incorreta
Afirma que vetores bicistrônicos expressam uma única proteína. Na verdade, vetores bicistrônicos (como os que utilizam IRES ou sequências 2A) permitem a expressão de duas proteínas a partir de um único mRNA. Além disso, para produzir anticorpos completos (HC e LC), normalmente se utiliza um único vetor bicistrônico que expressa ambas as cadeias, e não dois vetores separados. O uso de dois vetores bicistrônicos separados seria ineficiente e desnecessário.
Alternativa E — ❌ Incorreta
Afirma que vetores monocistrônicos permitem a expressão conjunta de LC e HC em um único mRNA. Isso é característico de vetores bicistrônicos, não monocistrônicos. Vetores monocistrônicos expressam apenas uma proteína por mRNA. Além disso, a expressão equilibrada das cadeias pesada e leve é mais facilmente obtida com vetores bicistrônicos ou de dupla expressão, não com monocistrônicos.
PEGA ESSA DICA!
Para memorizar: mono = um, bi = dois. Vetores monocistrônicos expressam uma proteína por mRNA; bicistrônicos expressam duas. Em produção de anticorpos, usa-se um único vetor bicistrônico ou vetores duais separados para HC e LC, mas nunca dois bicistrônicos.