Questão de Biologia — Métodos de Identificação de Bactérias — VUNESP 2024

Meio de cultura ágar MacConkey

Gabarito: letra D. O ágar MacConkey é um meio de cultura seletivo e diferencial, cujos componentes-chave são o cristal violeta e os sais biliares, que inibem o crescimento de bactérias Gram-positivas, permitindo o crescimento seletivo de bactérias Gram-negativas. A lactose presente no meio permite diferenciar bactérias fermentadoras (colônias rosas) das não fermentadoras (colônias incolores).

O ágar MacConkey é um dos meios de cultura mais utilizados em microbiologia clínica para o isolamento e a diferenciação de bacilos Gram-negativos, especialmente enterobactérias. Sua fórmula é cuidadosamente balanceada para cumprir duas funções principais: ser seletivo e ser diferencial. A seletividade é conferida principalmente pelo cristal violeta e pelos sais biliares, que inibem o crescimento de bactérias Gram-positivas e de alguns outros microrganismos, enquanto permitem o crescimento de bactérias Gram-negativas, que são mais resistentes a esses agentes. A função diferencial é exercida pela lactose e pelo indicador de pH vermelho neutro: bactérias que fermentam a lactose produzem ácidos, que acidificam o meio e fazem o indicador mudar de cor, resultando em colônias rosas ou vermelhas. Bactérias que não fermentam a lactose utilizam as peptonas como fonte de nutrientes, produzindo amônia e alcalinizando o meio, o que resulta em colônias incolores ou transparentes.

A composição típica do ágar MacConkey inclui peptonas (fonte de nitrogênio), lactose (carboidrato fermentável), sais biliares e cristal violeta (agentes seletivos), cloreto de sódio (mantém a pressão osmótica), vermelho neutro (indicador de pH) e ágar (agente solidificante). É importante notar que o meio não contém sangue, citrato de sódio como fonte primária de carbono, nem ácido málico. O entendimento da função de cada componente é essencial para a correta interpretação dos resultados e para a escolha do meio adequado em cada situação diagnóstica.

A banca explora a confusão entre os componentes de diferentes meios de cultura. Por exemplo, o ágar sangue é um meio enriquecido que contém sangue de carneiro, enquanto o ágar citrato de Simmons é um meio diferencial que contém citrato de sódio como única fonte de carbono. O ágar MacConkey, por sua vez, é um meio seletivo e diferencial, e seus componentes distintivos são o cristal violeta e os sais biliares. É fundamental que o aluno conheça a composição e a finalidade dos principais meios de cultura utilizados na rotina laboratorial.

Guarde a distinção entre os componentes que conferem seletividade (cristal violeta e sais biliares) e os que conferem diferenciação (lactose e indicador de pH): é exatamente nessa fronteira que as alternativas se dividem.

Alternativa A — ❌ Incorreta

O citrato de sódio é o componente principal do ágar citrato de Simmons, um meio utilizado para verificar a capacidade de um microrganismo de utilizar citrato como única fonte de carbono. Embora a lactose esteja presente no ágar MacConkey, o citrato de sódio não faz parte de sua composição. A alternativa erra ao combinar um componente de outro meio com um componente do meio em questão.

Alternativa B — ❌ Incorreta

O extrato de carne bovina e o sangue de carneiro são componentes do ágar sangue, um meio de cultura enriquecido, utilizado para o isolamento de bactérias fastidiosas e para a observação de hemólise. O ágar MacConkey não contém sangue em sua formulação, pois sua função é seletiva e diferencial, não enriquecedora. A presença de sangue inibiria a ação seletiva dos sais biliares e do cristal violeta.

Alternativa C — ❌ Incorreta

A peptona é um componente do ágar MacConkey, servindo como fonte de nitrogênio e aminoácidos. No entanto, o ácido málico não é um componente desse meio. O ácido málico é um ácido orgânico que pode ser utilizado em alguns meios para testes bioquímicos específicos, mas não faz parte da fórmula do ágar MacConkey. A alternativa erra ao incluir um componente que não pertence ao meio.

Alternativa D — ✅ Correta ⟵ GABARITO

O cristal violeta e os sais biliares são os agentes seletivos do ágar MacConkey. O cristal violeta é um corante que inibe o crescimento de bactérias Gram-positivas, enquanto os sais biliares inibem o crescimento de bactérias não entéricas e de alguns Gram-positivos. Essa combinação torna o meio seletivo para bactérias Gram-negativas, especialmente as da família Enterobacteriaceae. A alternativa identifica corretamente as principais substâncias que compõem o meio, conforme a pergunta.

Alternativa E — ❌ Incorreta

O sangue de carneiro é um componente do ágar sangue, não do ágar MacConkey. A peptona, embora presente no ágar MacConkey, não é o componente que o caracteriza. A alternativa erra ao incluir o sangue de carneiro, que não faz parte da composição do meio, e ao não mencionar os agentes seletivos que são essenciais para sua função.

Gabarito: letra D