Questão de Biologia — Equipamentos, Vidrarias e Lâminas — VUNESP 2024

Centrifugação de amostras de sangue: soro e plasma

Gabarito: letra D. A alternativa correta afirma que centrífugas com caçamba de ângulo móvel (rotor oscilante) permitem melhor separação das amostras do que as de ângulo fixo. Isso ocorre porque, no rotor de ângulo móvel, os tubos se reposicionam horizontalmente durante a rotação, fazendo com que a superfície do líquido fique perpendicular ao eixo de rotação, o que favorece a sedimentação dos componentes ao longo de todo o tubo, resultando em uma separação mais eficiente e com menor risco de hemólise.

A centrifugação é uma técnica de separação baseada na força centrífuga relativa (RCF), que acelera a sedimentação de partículas de diferentes densidades. No contexto de amostras de sangue, o objetivo é separar o soro ou o plasma das células sanguíneas (hemácias, leucócitos e plaquetas). O soro é obtido após a coagulação do sangue, enquanto o plasma é obtido a partir de sangue não coagulado, coletado em tubos com anticoagulante. A escolha do tubo, o tempo e a velocidade de centrifugação são fatores críticos para a qualidade da amostra.

A velocidade de centrifugação não depende exclusivamente do tipo de amostra, mas também do tipo de tubo, do volume, do rotor e do objetivo da análise. O freio da centrífuga não deve ser usado para interromper a centrifugação, pois a brusca interrupção pode causar hemólise e deslocar o gel separador. Após a formação da barreira (gel separador), não é recomendado realizar uma nova centrifugação, pois isso pode misturar os componentes novamente. O tipo de tubo utilizado interfere diretamente na aceleração e no tempo de centrifugação, pois diferentes tubos possuem diferentes densidades e composições.

A principal distinção entre os tipos de rotor é a geometria da caçamba. No rotor de ângulo fixo, os tubos permanecem em um ângulo fixo em relação ao eixo de rotação, o que faz com que as partículas sedimentem em um ângulo, podendo causar maior compactação e até mesmo hemólise. No rotor de ângulo móvel (oscilante), os tubos se movem para uma posição horizontal durante a rotação, permitindo que a sedimentação ocorra ao longo do eixo do tubo, resultando em uma separação mais limpa e eficiente. Essa é a razão pela qual o rotor de ângulo móvel é preferido para a separação de soro e plasma.

A pegadinha desta questão está em inverter a lógica dos tipos de rotor: a banca tenta fazer o candidato acreditar que o rotor de ângulo fixo é superior, quando na verdade o rotor de ângulo móvel é o mais adequado para a separação de componentes sanguíneos. Além disso, as alternativas A, B, C e E contêm afirmações incorretas sobre fatores que influenciam a centrifugação, como a velocidade, o uso do freio, a repetição do processo e a influência do tipo de tubo.

Guarde a fronteira entre os tipos de rotor e os cuidados na centrifugação: é exatamente nela que as alternativas se dividem.

Alternativa A — ❌ Incorreta

A velocidade de rotação não depende exclusivamente do tipo de amostra. Ela também depende do tipo de tubo, do volume da amostra, do rotor utilizado e do objetivo da análise (separação de soro ou plasma). A RCF recomendada para tubos com gel separador, por exemplo, é de 1300 a 2000 g, mas esse valor pode variar conforme o fabricante e o tipo de exame. Portanto, a afirmação é incorreta por ser restritiva demais.

Alternativa B — ❌ Incorreta

O uso do freio da centrífuga ao final do processo é inadequado. A brusca interrupção causada pelo freio pode provocar hemólise e deslocar o gel separador, comprometendo a qualidade da amostra. O correto é aguardar a centrífuga parar completamente antes de abrir a tampa e retirar os tubos. A afirmação inverte a recomendação correta, apresentando o uso do freio como benéfico quando, na verdade, é prejudicial.

Alternativa C — ❌ Incorreta

Após a formação da barreira (gel separador), não é recomendado realizar um novo processo de centrifugação. Isso pode misturar novamente os componentes já separados, comprometendo a qualidade da amostra. A centrifugação deve ser realizada uma única vez, com os parâmetros adequados, para garantir a separação correta. A afirmação sugere um procedimento que pode causar erro laboratorial.

Alternativa D — ✅ Correta ⟵ GABARITO

Centrífugas com caçamba de ângulo móvel (rotor oscilante) permitem melhor separação das amostras do que aquelas de ângulo fixo. No rotor de ângulo móvel, os tubos se reposicionam horizontalmente durante a rotação, fazendo com que a superfície do líquido fique perpendicular ao eixo de rotação. Isso favorece a sedimentação dos componentes ao longo de todo o tubo, resultando em uma separação mais eficiente e com menor risco de hemólise. No rotor de ângulo fixo, os tubos permanecem em um ângulo fixo, o que pode causar maior compactação e até mesmo hemólise. Portanto, a alternativa D está correta.

Alternativa E — ❌ Incorreta

O tipo de tubo utilizado para a coleta interfere diretamente na aceleração e no tempo de centrifugação. Diferentes tubos possuem diferentes densidades, composições e presença de gel separador ou anticoagulante, o que influencia os parâmetros de centrifugação. Por exemplo, tubos com gel separador requerem uma RCF específica para a formação da barreira. A afirmação é incorreta por negar essa influência.

Gabarito: letra D