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Questão de Técnicas em Laboratório — Microbiologia nas Técnicas em Laboratório — FGV 2010

Técnicas em LaboratórioMicrobiologia nas Técnicas em Laboratório
Código
fg140160
Banca
FGV
Órgão
FIOCRUZ
Ano
2010
Nível
Superior
Cargo
Tecnologista em Saúde - Desenvolvimento de Insumos Biológicos para a Saúde
Alguns métodos de conjugação de proteína com fluoróforo sugerem o uso de Carboxifluoresceina N-Succinimidyl Ester (CFSE) no lugar de Isotiocianato de Fluoresceína (FITC), por fornecerem melhor resultado de marcação. Os Succinimidyl Esteres são reagentes excelentes por sofrerem amino modificações, uma vez que os produtos amídicos formados são muito estáveis. CFSE possui alta reatividade com aminas alifáticas e baixa reatividade com aminas aromáticas. Sobre as estruturas abaixo, assinale a melhor alternativa.Imagem associada para resolução da questão
  1. APor apresentar alta reatividade com tirosinas, o CFSE é indicado para conjugar proteínas que são usadas em ensaio de incorporação celular.
  2. BDevido a característica do CFSE, os tampões contendo TRIS, não são os mais aceitáveis por interferirem na marcação.
  3. CO grupo funcional succinimidil-éster, ligado ao núcleo fluoresceína, produz o CFSE e formam derivados de amina reativos que possuem maior especificidade com muitas outras aminas na presença de outros nucleófilos.
  4. Da proteína marcada é separada do composto fluorescente com o uso de uma coluna de troca aniônica, seguida de extensiva diálise contra PBS.
  5. Eo CFSE é um composto fluorescente usado eficientemente como marcador celular.
Revelar gabarito e comentário

GabaritoA — Por apresentar alta reatividade com tirosinas, o CFSE é indicado para conjugar proteínas que são usadas em ensaio de incorporação celular.

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