Questão de Biologia — Geral — FEPESE 2023
- Código
- qa452259
- Banca
- FEPESE
- Órgão
- EPAGRI SC
- Ano
- 2023
- Cargo
- Ag APER ( )
A extração dos ácidos nucléicos (DNA e RNA) é o primeiro passo para a realização da maioria das metodologias de biologia molecular. Pode-se obter DNA a partir de inúmeros tipos de tecidos e células, e existe uma infinidade de protocolos para a realização de tal procedimento. A escolha do protocolo de extração de DNA dependerá de diversos fatores como: tipo de tecido a ser utilizado, grau de pureza e de integridade necessária para a aplicação em que o DNA será utilizado (PCR, sequenciamento, clonagem gênica etc.)
Para proceder a extração do DNA de determinada planta, suas folhas foram cortadas, transferidas para um cadinho e maceradas na presença de nitrogênio líquido.
Na sequência, adicionou-se à amostra o tampão de extração (Tris-HCl pH=8,0, EDTA, CTAB, PVP e NaCl) e incubou-se em banho maria a 70ºC, por tempo determinado. Foi, então, adicionado à amostra clorofórmio e álcool isoamílico; centrifugou-se a mistura, procedeu-se a transferência da fase que continha o DNA para um novo tubo e adicionou-se álcool isopropílico.
Assinale a alternativa correta sobre o procedimento de extração descrito no texto e os reagentes utilizados.
- AO uso do nitrogênio líquido foi indispensável para o rompimento da parede celular e a retirada dos ácidos nucleicos do interior do núcleo das células durante o processo de maceração.
- BO isopropanol ou álcool isopropílico desnatura as proteínas e as tornam insolúveis na fase aquosa, onde encontram-se os ácidos nucleicos.
- CO EDTA (ácido etileno diamônio tetracético), nesse protocolo de extração, agiu como antioxidante, protegendo o DNA da ação de compostos fenólicos.
- DO clorofórmio utilizado na etapa de precipitação de DNA, precipita o DNA na presença de íons como Na+.
- EO CTAB (brometo de cetiltrimetilamônio), presente no tampão de extração, teve como função evitar a ação de nucleases que possa degradar o DNA.