Questão de Biologia — Geral — FEPESE 2023

Analise as afirmativas abaixo sobre o sequenciamento de nova geração NGS (Next-generation sequencing).

1. O NGS de leitura longa ou sequenciamento de segunda geração. A característica comum das tecnologias de leitura longa é o sequenciamento massivo de moléculas de DNA amplificadas clonalmente (250-800 pb) e sequenciadas em paralelo.

2. Essas tecnologias de sequenciamento de leitura curta envolvem o sequenciamento massivo de leituras curtas paralelas, em que milhões de reações individuais de sequenciamento ocorrem em paralelo.

3. Em tecnologias de leitura curta, os dados de sequenciamento em longos trechos de DNA devem ser remontados, apresentando desafios com variações estruturais ou regiões de baixa complexidade.

4. Um pré-requisito para o NGS é uma biblioteca de boa qualidade. A preparação da biblioteca inclui primeiramente a obtenção de fragmentos, reparo final, ligação do adaptador e seleção de tamanho. A fragmentação quebra o DNA na faixa de tamanho ideal para a plataforma utilizada.

5. Em comparação com as tecnologias de sequenciamento de leitura curta, as tecnologias de leitura longa, também chamadas de tecnologias de sequenciamento de terceira geração, podem gerar sequências > 10 kb diretamente do DNA nativo.

Assinale a alternativa que indica todas as afirmativas corretas.