Questão de Biologia — Moléculas, células e tecidos — FEPESE 2026
Biologia›Moléculas, células e tecidos
Código
qg676256
Banca
FEPESE
Órgão
Polícia Científica - SC
Ano
2026
Nível
Superior
Cargo
Perito Oficial Criminal - Ciências Biológicas
Relacionado ao fenol empregado nas extrações de DNA e seus respectivos valores de pH, é correto afirmar que é utilizado:
AO pH ≈ 5,0, pois nessas condições o DNA permanece preferencialmente na fase aquosa.
BO pH ≈ 6,0, já que faixas mais altas de pH deslocam o DNA para a interface na hora da centrifugação.
CO pH ≈ 7,0, pois, em condições, o DNA permanece preferencialmente na fase líquida.
DO pH ≈ 8,0, já que faixas mais baixas de pH deslocam o DNA para a interface na hora da centrifugação.
EA extração com fenol independe do pH, uma vez que a separação entre DNA e proteínas ocorre pela densidade molecular dos compostos.
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GabaritoD — O pH ≈ 8,0, já que faixas mais baixas de pH deslocam o DNA para a interface na hora da centrifugação.
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Extração de DNA com fenol: o papel do pH
Gabarito: letra D. Na extração de DNA pelo método do fenol-clorofórmio, utiliza-se fenol em pH ≈ 8,0 (tamponado com Tris), pois em pH alcalino o DNA permanece na fase aquosa, enquanto as proteínas são desnaturadas e migram para a interface ou para a fase orgânica. Em pH mais baixo, o DNA tende a ficar retido na interface, comprometendo a recuperação. Essa é a base da alternativa correta.
A extração com fenol é uma técnica clássica de purificação de ácidos nucleicos. O fenol é um solvente orgânico que desnatura proteínas, mas o comportamento do DNA depende fortemente do pH da solução. O fenol comercial é ácido e, por isso, deve ser saturado com uma solução tampão (geralmente Tris-HCl) para atingir pH próximo de 8,0. Nessa condição, o DNA, por ser um ácido nucleico com grupos fosfato carregados negativamente, permanece hidrofílico e se mantém na fase aquosa (superior). As proteínas, ao serem desnaturadas, perdem sua estrutura e solubilidade, precipitando na interface entre as fases ou sendo extraídas para a fase orgânica (fenol).
Se o pH for ácido (por exemplo, 5,0 ou 6,0), o DNA pode sofrer protonação dos grupos fosfato, tornando-se menos hidrofílico e migrando para a interface durante a centrifugação, o que reduz drasticamente o rendimento da extração. Por isso, o controle do pH é essencial: valores baixos deslocam o DNA para a interface, enquanto valores em torno de 8,0 o mantêm na fase aquosa.
A alternativa E está incorreta ao afirmar que a extração independe do pH, pois a separação não ocorre apenas por densidade molecular — o pH é determinante para a partição do DNA entre as fases.
Extração de DNA com fenol: pH ≈ 8,0 (tampão Tris) (DNA permanece na fase aquosa, Proteínas desnaturadas → interface/fase orgânica); pH baixo (ácido) (DNA migra para a interface, Compromete a recuperação); Fenol comercial (Ácido → precisa ser tamponado)
Alternativa A — ❌ Incorreta
Afirma que o pH ≈ 5,0 mantém o DNA preferencialmente na fase aquosa. Isso é falso: em pH ácido, o DNA tende a ficar retido na interface, não na fase aquosa. O pH 5,0 é ácido e desloca o DNA para a interface, reduzindo a recuperação.
Alternativa B — ❌ Incorreta
Afirma que o pH ≈ 6,0 é utilizado e que faixas mais altas de pH deslocam o DNA para a interface. Está duplamente errado: o pH utilizado é em torno de 8,0, e são faixas mais baixas (ácidas) que deslocam o DNA para a interface, não as mais altas.
Alternativa C — ❌ Incorreta
Afirma que o pH ≈ 7,0 é o utilizado. Embora o pH neutro seja próximo do fisiológico, o valor consagrado na técnica é pH ≈ 8,0 (tampão Tris). Em pH 7,0, a extração pode não ser tão eficiente quanto em pH 8,0, e a alternativa não reflete o procedimento padrão.
Alternativa D — ✅ Correta ⟵ GABARITO
Correta ao afirmar que o pH ≈ 8,0 é utilizado e que faixas mais baixas de pH deslocam o DNA para a interface na centrifugação. Em pH alcalino, o DNA permanece na fase aquosa; em pH ácido, ele migra para a interface, comprometendo a extração.
Alternativa E — ❌ Incorreta
Afirma que a extração com fenol independe do pH, pois a separação ocorre pela densidade molecular. Isso é falso: o pH é um fator crítico, pois determina a ionização dos grupos fosfato do DNA e, consequentemente, sua partição entre as fases aquosa e orgânica. A densidade molecular não é o mecanismo principal de separação nessa técnica.
NÃO CAIA NESSA!
A banca explora a inversão do efeito do pH: o candidato pode lembrar que "pH ácido" está associado a "DNA na interface", mas trocar o sentido (dizer que pH alto desloca para a interface) ou usar valores errados (5,0, 6,0, 7,0) são armadilhas comuns. Lembre-se: pH ≈ 8,0 = DNA na fase aquosa; pH baixo = DNA na interface.
PEGA ESSA DICA!
Para fixar, associe: "pH 8 = DNA na água (fase aquosa)" e "pH ácido = DNA na interface". Na prova, desconfie de alternativas que citam pH 5,0 ou 6,0, pois o padrão é 8,0. Se a questão mencionar "fenol", lembre-se de que ele deve ser tamponado com Tris para pH alcalino.