Questão de Biologia — Hereditariedade e diversidade da vida — FUMARC 2021
Biologia›Hereditariedade e diversidade da vida
Código
qq640581
Banca
FUMARC
Órgão
PC-MG
Ano
2021
Nível
Superior
Cargo
Perito Criminal
Além de clonar e amplificar o DNA, as técnicas moleculares são usadas para analisar as moléculas de DNA pelo estudo e pela determinação de suas sequências”PIERCE, Benjamin A.; ROSÁRIO, Beatriz Araújo do. Genética: um enfoque conceitual. 5. ed. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 2016. 759 p.Sobre a análise do DNA, é CORRETO afirmar:
AA maior parte do fingerprinting de DNA utiliza polimorfismos de nucleotídeo único.
BO sequenciamento de DNA pelo método didesoxi de Sanger é uma das tecnologias de sequenciamento de próxima geração, sendo mais rápido e menos dispendioso que o método tradicional.
CO sequenciamento illumina emprega uma tecnologia semelhante à do método didesoxi de Sanger já que possui nucleotídeos marcados com diferentes fluorescências e cada nucleotídeo possui um terminador, embora os terminadores sejam reversíveis no sequenciamento illumina.
DPolimorfismos de comprimento do fragmento de restrição são mutações sinônimas associadas com manifestações de doenças.
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GabaritoC — O sequenciamento illumina emprega uma tecnologia semelhante à do método didesoxi de Sanger já que possui nucleotídeos marcados com diferentes fluorescências e cada nucleotídeo possui um terminador, embora os terminadores sejam reversíveis no sequenciamento illumina.
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Sequenciamento de DNA: Sanger e Illumina
Gabarito: letra C. O sequenciamento Illumina (NGS) e o método de Sanger compartilham o uso de nucleotídeos terminadores marcados com fluorescência, mas no Illumina os terminadores são reversíveis, permitindo a continuação da síntese após a leitura – exatamente o que a alternativa descreve.
A banca explora a confusão entre os métodos de sequenciamento de primeira e de próxima geração. É fundamental entender as semelhanças e diferenças entre o método de Sanger (primeira geração) e o Illumina (NGS). Ambos utilizam DNA polimerase e nucleotídeos modificados que interrompem a síntese e emitem fluorescência, mas a principal diferença está na natureza do terminador: no Sanger, o terminador (ddNTP) é irreversível; no Illumina, o terminador é reversível, permitindo múltiplos ciclos.
NÃO CAIA NESSA!
A alternativa B tenta fazer o aluno crer que o método de Sanger é uma técnica de NGS. Na verdade, Sanger é considerado primeira geração; as tecnologias NGS (Illumina, 454, etc.) são mais rápidas e baratas por base, mas não incluem o Sanger. Já a alternativa C exige atenção ao detalhe dos terminadores reversíveis – muitos alunos pensam que Illumina é totalmente diferente, mas ele se baseia no mesmo princípio de terminadores marcados.
Sequenciamento de DNA
11ª geração: Sanger
Terminador irreversível (ddNTP)
Mais lento e caro por base
2NGS (próxima geração)
Illumina
Terminador reversível
Nucleotídeos marcados com fluorescência
Mais rápido e barato por base
Outros: 454, Ion Torrent
3Fingerprinting de DNA
STRs (maioria)
RFLPs
SNPs (minoria)
LEVEL · soulevel.com.br
Alternativa A — ❌ Incorreta
A maior parte do fingerprinting de DNA utiliza STRs (short tandem repeats) ou RFLPs, e não polimorfismos de nucleotídeo único (SNPs). Embora SNPs também sejam usados em algumas aplicações, a maioria dos perfis forenses ainda é baseada em STRs.
Alternativa B — ❌ Incorreta
O método de Sanger é de primeira geração, não de próxima geração (NGS). As tecnologias NGS (Illumina, 454, Ion Torrent) são mais rápidas e menos dispendiosas que o Sanger quando se considera o custo por base e a escala. Sanger é mais lento e caro para grandes projetos.
Alternativa C — ✅ Correta ⟵ GABARITO
O sequenciamento Illumina, assim como o método de Sanger, utiliza nucleotídeos terminadores marcados com fluoróforos. A diferença crucial é que no Illumina os terminadores são reversíveis: após a captura da fluorescência, o bloqueio 3' é removido e o fluoróforo é clivado, permitindo a incorporação do próximo nucleotídeo. No Sanger, os ddNTPs são terminadores irreversíveis, gerando fragmentos de tamanhos variados.
Alternativa D — ❌ Incorreta
Polimorfismos de comprimento de fragmento de restrição (RFLP) são variações nos sítios de restrição, geralmente causadas por mutações de ponto que criam ou abolem um sítio de restrição. Essas mutações não são necessariamente sinônimas (silenciosas) e podem ou não estar associadas a doenças; a afirmação de que são "mutações sinônimas associadas com manifestações de doenças" é uma generalização incorreta.