Questão de Biologia — Moléculas, células e tecidos — IBFC 2023

Microscopia: tipos de microscópios e técnicas de preparação

Gabarito: letra E. Os microscópios eletrônicos não permitem observar organismos ou células vivas, pois o material precisa ser fixado e cortado em fatias muito finas (ultrafinas) para que o feixe de elétrons o atravesse — o que inviabiliza qualquer amostra viva. Essa é a alternativa correta, e as demais apresentam erros conceituais sobre a classificação dos microscópios e sobre as técnicas de preparação de amostras.

A microscopia é o conjunto de técnicas que permite visualizar estruturas invisíveis a olho nu, e seu desenvolvimento foi essencial para a Citologia. Existem dois grandes grupos de microscópios: os ópticos (ou fotônicos), que usam luz visível e lentes de vidro, e os eletrônicos, que usam feixes de elétrons e lentes eletromagnéticas. Os eletrônicos se dividem em transmissão (MET) e varredura (MEV): o primeiro faz o feixe de elétrons atravessar a amostra, exigindo cortes ultrafinos; o segundo varre a superfície da amostra, gerando imagens tridimensionais. Já os ópticos podem ser simples (uma lente) ou compostos (várias lentes), e não se classificam em transmissão e varredura — essa é uma confusão comum que a banca explora.

A resolução (ou poder de resolução) é a capacidade de distinguir dois pontos muito próximos como separados; quanto maior a resolução, menor o limite de resolução. O aumento é a ampliação da imagem. Aumento e resolução são parâmetros distintos: um microscópio pode ter alto aumento e baixa resolução, gerando imagens grandes porém borradas. Além disso, o campo de visão diminui conforme o aumento aumenta — é uma relação inversa, não direta.

As técnicas de preparação também são cobradas: o esfregaço é usado para células que ficam separadas umas das outras, como as do sangue, espalhando a amostra sobre uma lâmina; já para células firmemente unidas, como as de tecidos, usa-se a inclusão e corte (com micrótomo). A fixação mata as células rapidamente para preservar sua estrutura, e a coloração aumenta o contraste.

Alternativa A — ❌ Incorreta

Afirma que os microscópios de luz se classificam em transmissão e varredura. Isso é um erro: transmissão e varredura são categorias dos microscópios eletrônicos, não dos ópticos. Os microscópios de luz (fotônicos) se classificam em simples (uma lente) e compostos (objetiva + ocular). A banca troca a classificação de um grupo pelo outro.

Alternativa B — ❌ Incorreta

Afirma que os microscópios eletrônicos se classificam em estereoscópicos e biológicos. Errado: os eletrônicos se dividem em transmissão (MET) e varredura (MEV). Os termos "estereoscópico" e "biológico" não são categorias de microscópios eletrônicos — estereoscópico refere-se a um tipo de microscópio óptico que fornece imagem tridimensional, e "biológico" é um adjetivo genérico.

Alternativa C — ❌ Incorreta

Afirma que o esfregaço é uma técnica para visualizar células animais através de cortes histológicos. Há dois erros: o esfregaço não envolve cortes histológicos — ele espalha a amostra sobre a lâmina, sendo usado para células que ficam separadas, como as sanguíneas. Cortes histológicos são feitos por inclusão e corte (microtomia), técnica indicada para células firmemente unidas.

Alternativa D — ❌ Incorreta

Afirma que quanto maior o aumento, maior deve ser a resolução e maior será o campo de visão. O erro está na relação com o campo de visão: quanto maior o aumento, menor é o campo de visão (relação inversa). A primeira parte — que maior aumento exige maior resolução para gerar imagens nítidas — é correta, mas a segunda invalida a alternativa.

Alternativa E — ✅ Correta ⟵ GABARITO

Afirma que os microscópios eletrônicos não permitem estudar organismos ou células vivas, pois o material deve ser fixado e cortado em fatias muito finas. Isso está correto: no MET, o feixe de elétrons precisa atravessar a amostra, o que exige cortes ultrafinos (de 50 a 100 nm) obtidos com ultramicrótomo, após fixação química ou por congelamento. Esse processo mata a amostra, impossibilitando a observação de material vivo. No MEV, embora não haja corte, a amostra também precisa ser fixada e metalizada, o que igualmente impede o estudo de células vivas.

Gabarito: letra E